玻璃化冷冻牛体外受精胚胎不同解冻方法试验研究

用添加5％犊牛血清(FCS)的TCM-199进行卵母细胞成熟,BO液进行体外受精后,在5％犊牛血清的CR1aa液进行体外培养获得牛体外受精胚胎。经玻璃化冷冻保存,解冻后分别用分步脱出保护剂和一步脱出冷冻保护剂后,进行孵化试验,解冻后透明带完整率为100％,解冻后分步脱出保护剂和一步脱出保护剂存活率分别为90％(36／40)、50％(20／40);囊胚孵化率分别为80.6％(29／36)、35％(7／20);48小时存活率分别为52.8％(19／36)、20％(4／20);两者间差异极显著(P<0.01)。用含20％和5％犊牛血清(FCS)的TCM-199培养孵化,分步法脱出保护剂,培养囊胚孵化率分别为83.3％(15／18)、77.8％(14／18);48小时存活率分别为55.6％(10／18)、50.0％(9／18)。两者差异不显著(P>0.05)。用含20％和5％犊牛血清(FCS)的TCM-199培养,一步法脱出保护剂囊胚孵化率分别为40％、30％,两者差异不显著(P>0.05)。48小时存活率相同,为20％。本试验结果表明,玻璃化冷冻胚胎,分步法添加保护剂,解冻后分步脱出保护剂可以获得较高的存活率和囊胚孵化率。