摘要
目的研究移植脑组织块内的微小血管的新生 ,探讨脑组织移植条件下微小血管内皮细胞生存的必要条件。方法用日本大耳白雄性成兔 ,1.2～1.5kg ,30只进行自体脑组织移植实验 ,3 %戊巴比妥钠静脉麻醉下施行自体脑组织移植手术。颅骨左右对称开骨窗 ,切取大脑皮质顶叶左右对称区域2mm×2mm×1mm脑组织 ,完全游离后 ,5s内迅速交换移植 ,移植组织中央插入标记物。术后10d再行开颅 ,使用微循环彩色摄像系统放大185倍 ,对移植脑组织内新生的微小血管进行画像解析 ,观测标记物周边有否新生血管及其形态特征。连同标记物一同切除左右移植区域的脑组织约2mm×2mm×1mm大小 ,迅速将标本放入20%甲醛溶液中固定 ,HE染色 ,制作蜡块 ,连同标记物一起制作切片。光镜下观察皮质颗粒层内神经细胞的形态 ,分析移植后神经细胞是否存活 ,是否有血管新生 ,血管形态与宿主血管的差异。新生血管内有否红细胞。为研究血管内皮细胞的生存条件 ,对人胎盘脐静脉血管内皮细胞进行培养。取胎盘脐带 (长度不小于20cm) ,放入无菌的营养液中 ,4℃保存运输 ,在1h内开始培养 ,把脐带放入无菌培养皿中 ,修剪丢弃损伤或血肿的组织,用无菌Hank's液反复冲洗去除污物。用缝合线将脐带静脉一端严密结扎 ,从另一端向脐静脉内灌注0.15%胰蛋白酶 。
