β-淀粉样蛋白对原代培养的大鼠海马小胶质细胞IL-1β及iNOS mRNA水平的影响

目的观察β-淀粉样蛋白 (amyloid -betaprotein,Aβ)对原代培养的大鼠海马小胶质细胞白细胞介素1β(IL -1β)及诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA水平的影响。探讨Aβ诱导的氧化应激和炎症反应在阿尔茨海默病 (Alzheimerdisease,AD)发病中的作用。方法取新生24h内SD大鼠 ,无菌条件下分离海马 ,进行混合神经细胞的原代培养 ,并于混合培养的第5d通过低速振荡的方法分离得到小胶质细胞。将老化3d的Aβ 25 -35(溶于DMEM无血清培养液 )加入已培养7d的小胶质细胞中 ,使Aβ终浓度为1μmol/L,建立Aβ 诱导神经损伤的细胞模型 ,同时设立空白对照 (不加入Aβ25 -35)。经上述处理的小胶质细胞继续培养48h后抽提总RNA ,通过半定量RT-PCR的方法观察体外条件下Aβ25 -35 对小胶质细胞IL -1β 及iNOSmRNA水平的影响 (内参照为β-actin)。实验数据用SPSS软件进行t检验。结果1μmol/LAβ 25 -35作用于原代培养的大鼠海马小胶质细胞48h后 ,IL -1β、iNOSmRNA水平均较空白对照组明显升高 (P<0.001)。结论AD是一种以记忆减退、认知障碍、人格改变为临床特征的老年中枢神经系统退行性疾病 ,其典型的病理特征是Aβ 异常沉积形成的老年斑。斑块周围显著的神经退行性改变和胶质细胞的活化提示Aβ 可能是引起AD中神经元丢失和炎症反?