AP-1在转录水平调控氧化低密度脂蛋白诱导的转化生长因子-β_1表达(摘要)

目的 了解转录激活蛋白-1(AP-1)是否参与调控氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导转化生长因子-β1(TGF-β1)基因的表达，探讨Ox-LDL激活AP-1可能的信号转导途径。方法 首先利用SD大鼠TGF-β1启动子缺失体-荧光素酶(1uciferase)报告基因瞬时转染系细胞并检测虫荧光素酶相对活性，找出可能的应答区域；然后对AP-1结合位点进行突变并加入c-Jun／AP-1抑制剂，比较启动子活性的变化情况。利用Western印迹检测Ox-LDL对系膜细胞p38有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)总蛋白和磷酸化水平的影响。最后，用凝胶阻滞法(EMSA)观察在特异性蛋白激酶抑制剂处理下的AP-1活性的变化。结果对Ox-LDL刺激应答，TGF-β1启动子-1550到-845之间是一个正调控区域，-629到-422之间则是一个负调控区。AP-1结合位点突变和c-Jun／AP-1抑制剂均导致TGF-β1启动子活性显著降低。在Ox-LDL刺激下p38 mPAK表现出的不是量的变化，而是其磷酸化水平的增加。PKC抑制剂明显地抑制了Ox-LDL诱导的AP-1活性；与之相反，p38 MPAK抑制剂则对AP-1活性无显著影响。结论 在大鼠肾系膜细胞，AP-1在转录水平参与调控Ox-LDL诱导TGF-β1表达的过程，且Ox-LDL可能部分是通过PKC信号转导途径激活AP-1中的c-Jun蛋白，再由c-Jun／AP-1从转录水平上调TGF-β1的表达。