摘要
本文报导了从王杂鸽的肝、肾、骨和小肠等四个脏器中用正丁醇抽提,高速离心,Sephedex G—100凝胶层折及DEAE—纤维素离子交换等方法分离纯化了碱性磷酸酶(AKP),并用聚丙烯酰胺凝胶平板电泳进行了分离鉴定,达到PAGE纯的各脏器AKP同功酶。其中肝AKP同功酶谱有三条带,肾AKP同功酶谱为一条带,骨AKP有二条带,肠AKP有一条带。我们对提纯了的各脏器AKP同功酶进行了生物学特性的研究。1.各脏器AKP R_f值肾>骨>肝>小肠。2.56℃±1作用10分钟、骨AKP保留活性3.8％,肝AKP保留活性13.4％,肠AKP保留活性38.8％,肾AKP保留活性58.4％。3.四个脏器AKP对磷酸苯二钠的Km是:骨Km0.581×10^(-6)M,肝Km0.305×10^(-6)M,肠km0.607×10^(-6)M,肾Km0.436×10^(-6)M。4.L—phe的抑制作用是:小肠AKP>肾AKP>骨AKP。对肝AKP无抑制作用。5.L—Leu,L—Arg,Urea均对小肠有强烈的抑制作用。肝AKP、骨AKP对L—Leu均不敏感,肾AKP对L—Leu稍敏感。肝AKP对Urea的敏感性高于肾AKP、骨AKP。6.EDTA—Na_2对各脏器 AKP均有强烈的抑制作用。故根据上述各种生物学特性可把鸽肝、肾、骨、肠四个脏器AKP同功酶分离开。
