DNA自动测序中的常见影响因素及测序反应体系的优化

General influence factors on automated DNA sequencingand optimized sequencing reaction system

目的 :分析和研究 DNA测序过程中影响因素及其测序反应体系的优化。方法 :对 DNA测序体系中模板、引物、测序产物的纯化及 3种测序反应体系对测序结果的影响进行比较。结果 :采用 5 μL (含 1μLTRR)、 5 μL (含 2 μL TRR)和 10 μL (含 4 μL TRR)测序反应体系对同一质粒 DNA进行测序 ,其可判读序列都能达到 72 0 bp以上。结论 :DNA自动测序的质量与模板的纯度、浓度、所用引物、测序反应体系及测序反应产物的纯化有直接的关系。采用 5 μL (含 1μL TRR)测序反应体系在保证测序质量的同时可降低 DNA测序成本。