“简化四步法”冻贮角膜技术的实验研究

为探索简易有效的冻贮角膜技术,对Capella法和"简化二步法"的冷冻保护液、降温冷冻和复温方法3项关键技术做了比较性研究和改进。应用台盼蓝和茜素红联合染色评价角膜内皮细胞活率(ESR)和光镜下内皮细胞形态,优选出"简化四步法"冷冻技术:用20%人血清白蛋白与2%、4%、6%和7.5%二甲基亚砜配伍为保护液;四步冷平衡各15min;应用简易降温仪先以1～3℃/min降温至—30℃,再以3～10℃/min降温至—80℃;液氟中贮存;40℃水浴复温。结果表明,ESR为92.6%(n=30),内皮细胞界限清晰,大小一致,优于"简化二步法",而与Capella法相近,符合临床穿透性角膜移植的标准要求。