三氧化二砷诱导T淋巴细胞白血病细胞株凋亡研究

The apoptosis in T lymphoblastic leukemia cell lines induced by arsenic trioxide

目的 研究 三 氧 化 二砷（Ａｓ２Ｏ３）对 Ｔ 淋 巴 细 胞白 血 病 细 胞株 的 作 用及 其 机 制 。 方 法 用 四 甲基 偶 氮 唑 蓝（ Ｍ ＴＴ）法 观 察 药 物 对 细 胞 株 的 生 长 抑 作 用 ，流 式 细 胞 仪 测 定 细 胞 凋 亡 峰 ，端 粒 重 复 扩 增 法 检 测 端 粒酶 活 性 ，实 时 ＲＴ－ＰＣＲ 测 定 端 粒 酶 逆 转 录 酶（ ｈＴＥＲＴ）基 因 表 达 。 结 果 ２～６μｍ ｏｌ蛐Ｌ Ａｓ２Ｏ ３可 抑 制 Ｍ ｏｌｔ－４细 胞生 长 ，且 随 着 时 间 的 延 长 和 药 物 剂 量 的 增 大 ，这 种 抑 制 作 用 更 为 明 显（ Ｐ＜０．０５）。 药 物 作 用 ７２ｈ，Ａｓ２Ｏ ３对 Ｍ ｏｌｔ－４细 胞 生 长 抑 制 半 数 致 死 量 为 ４．６８μｍ ｏｌ蛐Ｌ。 ２～６μｍｏｌ蛐Ｌ 浓 度 范 围 内 ，Ａｓ_２Ｏ_3 诱 导 Ｍ ｏｌｔ－４细 胞 的 凋 亡 率 随 时 间 的 延长 和 药 物 剂 量 的 增 大 而 升 高 （ Ｐ＜０．０５ ）。 ６μｍ ｏｌ蛐Ｌ 药 物 作 用 ９６ｈ，Ｋ５６２细 胞 和 Ｍ ｏｌｔ－４细 胞 的 凋 亡 率 分 别 为８３．４４％±１８．０４％和 ７７．９３％±６．００％。Ａｓ２Ｏ３能 显著 抑 制 Ｍ ｏｌｔ－４细 胞株 端粒 酶 活性，下 调 ｈＴＥＲＴ ｍ ＲＮＡ 表达 。结 论 Ａｓ?

Objective To investigate the effects of arsenic trioxide on T lymphoblastic leukemia cell lines and its mechanism. Methods The growth inhibition, cell apoptosis, telomerase activity and the gene expression of human telomerase reverse transcriptase ,hTERT, were determined by methyl thiazolyl tetrazolium ,MTT, reduction assay, flow cytometry ,FACS,, telomeric repeat amplification protocol ,TRAP, and real-time RT-PCR respectively. Results Arsenic trioxide at concentrations of 2～6μmol/L significantly inhibited the growth of Molt-4 cells, and induced apoptosis in time- and dose-dependent manner. The sensitivity of Jurkat cell lines to arsenic trioxide was lower than that of Molt-4 cells. Moreover, arsenic trioxide also notably inhibited the telomerase activity of Molt-4 cells and down-regulated the expression of hTERT mRNA. Conclusion The reduction of telomerase activity and down-regulation of hTERT mRNA expression may contribute to the cell growth inhibition and apoptosis of lymphoblastic leukemia cell line induced by arsenic trioxide.