消化道肿瘤浸润淋巴细胞的提取、培养及表型分析

用机械分离、酶解聚和非连续密度梯度离心方法从28例消化道肿瘤制取肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)单细胞悬液。每克湿重瘤组织细胞得率为20.78±9.82×10~6(6.09～78.40×10~6),淋巴细胞占67.29±11.78％。相同方法自17例肿瘤区域淋巴结中得到的细胞为38.08±17.42×10~6/每克淋巴结,淋巴细胞占82.08±8.48％。在含高浓度rIL-2中培养时、区域淋巴结淋巴细胞(RNL)增殖力最强,PBL的增殖反应发生最早,但扩增时间短。免疫荧光标记流式细胞仪分析,患者淋巴细胞CD4比例减少,CD8增加,CD4/CD8显著降低,CD25^+细胞增加。经rIL-2培养后,T细胞(CD2^+,CD3^+)增加,多数样本以CD8生长为主,对照组以CD4生长为主。CD25^+细胞逐渐增加。TIL、RNL、PBL中Tac抗原最高表达率分别达36.8％、44.2％、20.6％。