摘要
以携带质粒pAM120(Ap^t、Tc^t/Tn916)的大肠杆菌(Ecoli)CG120株为供体菌,与受体菌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)J-1株,采用滤膜接合法进行接合转移,在选择平板(含Tc、cfz和脱脂奶)上进行筛选,筛选出6株蛋白酶缺失株(ECPase),ECPase菌株其生长速度,对正常鲫鱼血清的抗性降低,用脱脂奶平板法及底物法检测,蛋白酶产量明显降低。与亲本J-1株相比,突变株致病力降低.对鲫鱼的半数致死量大于10^8(J-1株对鲫鱼的半数致死量为5×10^3)。用ECPase突变株MJ-1株的18h培养物(5×10^6CFU)接种健康鲫鱼,不产生亲本J-1株引起的病变及死亡。用MJ-1活菌免疫鲫鱼,在第5周产生较高的凝集抗体,且对强毒株J-1的攻击有保护作用。表明蛋白酶是嗜水气单胞菌的一个重要的毒力因子。ECPase突变株仍具有免疫原性。