摘要
以携带质粒pAM120(Ap^t、Tc^t／Tn916)的大肠杆菌(Ecoli)CG120株为供体菌，与受体菌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)J-1株，采用滤膜接合法进行接合转移，在选择平板(含Tc、cfz和脱脂奶)上进行筛选，筛选出6株蛋白酶缺失株(ECPase)，ECPase菌株其生长速度，对正常鲫鱼血清的抗性降低，用脱脂奶平板法及底物法检测，蛋白酶产量明显降低。与亲本J-1株相比，突变株致病力降低．对鲫鱼的半数致死量大于10^8(J-1株对鲫鱼的半数致死量为5×10^3)。用ECPase突变株MJ-1株的18h培养物(5×10^6CFU)接种健康鲫鱼，不产生亲本J-1株引起的病变及死亡。用MJ-1活菌免疫鲫鱼，在第5周产生较高的凝集抗体，且对强毒株J-1的攻击有保护作用。表明蛋白酶是嗜水气单胞菌的一个重要的毒力因子。ECPase突变株仍具有免疫原性。
