利用安全性转基因技术导入反义蜡质基因降低稻米直链淀粉含量

利用安全性转基因技术中的共转化法, 将分别含有 p13W4 双元载体(含有潮霉素抗性基因、gus报告基因以及反义蜡质基因片段)和 p13W8双元载体(无潮霉素抗性基因和 gus 报告基因, 只含有反义蜡质基因片段)的根癌农杆菌以 1︰9 的比例混合导入超 2-10 高产水稻新品系中, 获得 34 棵转基因植株.PCR 分析转基因 T0 代植株, 结果显示, 有 15 株是共转化植株, 共转化率为 44.1%. 利用 p13W4 双元载体上的 gus 报告基因从 T1代种子中淘汰具有报告基因及抗性标记基因的转基因后代, 再利用 PCR 检测从 T1代植株中获得只有反义蜡质基因的植株. Southern blot杂交分析证实, p13W8双元载体 T-DNA已整合进入无抗性标记及报告基因的转基因后代基因组中. T2代成熟种子直链淀粉含量分析显示, 转基因植株糙米直链淀粉含量比对照有不同程度的下降, 幅度最大的比对照降低 28.61%. 由于获得的转基因后代只有目的基因而无抗性选择标记基因和报告基因, 而且水稻中的稻米直链淀粉含量已降低, 它们既可被用于筛选软米材料, 也可视为是能够用于其他水稻稻米食味品质改良的水稻新资源.