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应用噬菌体展示技术筛选HBsAg启动子I的DNA结合蛋白 被引量：4

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摘要 目的:通过筛选HBsAg基因启动子Ⅰ(SP Ⅰ,surface promoter Ⅰ)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径. 方法:应用噬菌体展示技术,以HBsAg基因启动子Ⅰ的聚合酶链反应(PCR)产物DNA作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行4轮“黏附-洗脱-扩增”筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列分析和同源性搜索. 结果:噬菌体经富集后,从随机筛选的14个克隆中得到8 个阳性克隆,成功构建了克隆载体.序列测定后经过同源性搜索,确定了和HBV表面抗原基因启动子Ⅰ特异结合的肝细胞蛋白,共编码7种蛋白.其中3个克隆编码未知功能蛋白;其余的克隆分别编码4-氨基丁酸氨基转移酶、触珠蛋白、复制蛋白等蛋白. 结论:用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到HBsAg基因启动子Ⅰ的结合蛋白,分析了该蛋白的编码基因.
作者 杨艳杰 成军 陈东风 王春花 黄燕萍 吴煜 刘敏 王建军 钟彦伟 刘妍 张黎颖
机构地区 中国人民解放军第 中国人民解放军第三军医大学大坪医院消化内科
出处 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第11期2737-2739,共3页 World Chinese Journal of Digestology
基金 国家自然科学基金项目 No.C0301 1402 No.C30070689军队"九 五"科技攻关项目 No.98D063军队回国留学人员启动基金项目 No.98H038军队"十 五"科技攻关青年基金项目 No.01Q138
关键词 噬菌体展示技术 筛选 HBSAG 启动子I DNA结合蛋白 聚合酶链反应 乙型肝炎病毒
分类号 R392 [医药卫生—免疫学]
  • 相关文献

参考文献8

二级参考文献69

  • 1Shuang Ping Guo~1 Wen Liang Wang~1 Yu Qiang Zhai~2 Yi Ling Zhao~1 ~1Department of Pathology,Xijing Hospital of the Fourth Military Medical University,Xi’an,China ~2Department of Urology,the Central Hospital of Xi’an,China.Expression of nuclear factor-KB in hepatocellular carcinoma and its relation with the X protein of hepatitis B virus[J].World Journal of Gastroenterology,2001,7(3):340-344. 被引量：55
  • 2[1]Urashima T,Saigo K,Kobayashi J,et al.Identification of hepatitis B virus integration in hepatitis C virusinfected hepatocellular carcinoma tissues.J Hepatol,1997,26:771-778
  • 3[2]Takeuchi M,Fujimoto J,Niwamoto H,et al.Frequent detection of hepatitis B virus X-gene DNA in hepatocellular carcinoma and adjacent liver tissue in hepatitis B surface antigen-negtive patients.Dig Dis Sci,1997,42:2264-2269
  • 4[3]Sambrook J,Fritsch EF,Maniatis T.Molecular cloning. New York:Cold Spring Harbor Laboratory,1989.363-371,474-491
  • 5[4]Chomczynski P,Sacchi N.Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenolchloroform extraction.Anal Biochem,1987,162:156-159
  • 6[5]Hogan B,Costantini F,Lacy E.Manipulating the mouse embryo.New York:Cold Spring Harbor Laboratory,1986.89-180
  • 7[6]Murakami S.Hepatitis B virus X protein:structure,function and biology.Intervirology,1999,42:81-99
  • 8[7]Andrisani OM,Barnabas S.The transcriptional function of the heptitis B virus X protein and its role in hepatocarcinogenesis.Int J Oncol,1999,15:373-379
  • 9[8]Lee TH,Finegold MJ,Shen RF,et al.Hepatitis B virus transactivator x protein is not tumorigenic in transgenic mice.J Vird,1990,64:5939-5947
  • 10[9]Koike K,Moriya K,Iino S,et al.High-level expression of hepatitis B virus HBx gene and hepatocarcinogenesis in transgenic mice. Hepatology,1994,19:810-819

共引文献120

同被引文献57

  • 1高学松,成军,甄真,郭江,张黎颖.乙型肝炎核心启动子的研究进展[J].世界华人消化杂志,2005,13(8):933-936. 被引量：5
  • 2Kramvis A, Kew MC. The core promoter of hepatitis B virus[J]. J Viral Hepat, 1999, 6(6) 1415-427.
  • 3Gunther S, Piwon N, Will H. Wild-type levels of pregenomic RNA and replication but reduced pre-C RNA and e-antigen synthesis of hepatitis B virus with C(1653)→T,A(1762)→T and G(1764)→A mutations in the core promoter[J].J Gen Virol, 1998, 79(pt2) :375- 380.
  • 4Scaglioni PP, Melegari M, Wands JR. Biologic properties of hepatitis B viral genomes with mutations in the precore promoter and precore open reading frame[J]. Virology, 1997, 233(2) : 374-381.
  • 5Sheldon J, Rodes B, Zouhm F, et al. Mutations affecting the replication capacity of the hepatitis B virus[J]. J Viral Hepat, 2006, 13 (7) :427-434.
  • 6Moriyama K, Okamoto H, Tsuda F, et al. Reduced precore transcription and enhanced core-pregenome transcription of hepatitis B virus DNA after replacement of the precore-core promoter with sequences associated with e antigen-seronegative persistent infections [J]. Virology, 1996, 226(2) :269-280.
  • 7Marrone A, Zampino R, Luongo G, etal. Low HBeAg serum levels correlate with the presence of the double A1762T/G1764A core promoter mutation and a positive response to interferon in patients with chronic hepatitis B virus infection[J]. Intervirology, 2003, 46(4): 222-226.
  • 8骆抗先.乙型肝炎基础和临床（第2版）[M].北京:人民卫生出版社,2001.415-435.
  • 9Galibert F, Mandart E, Fitoussi F, et al. Nucleotide sequence of the hepatitis B viruse genome( subtype ayw) cloned in E. coli. Nature, 1979,281 ( 5733 ):646-650.
  • 10Okamoto H, Tsuda F, Akahane Y, Sugai Y, Yoshiba M,Moriyama K, Tanaka T, Miyakawa Y, Mayumi M. Hepatitis B virus with mutations in the core promoter for an e antigen-negative phenotype in carriers with antibody to e antigen. J Virol 1994,68:8102-8110.

引证文献4

二级引证文献10

世界华人消化杂志
2004年 第11期

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