从酵母细胞转移到大肠杆菌快速穿梭质粒制备法

作为一种遗传系统的酿酒酵母的重要性日益增长,从酵母转化子中分离质粒成为一门很重要的技术。通常使用两种质粒分离方案:第一种,从酵母转化子中直接分离质粒。此法的问题是通过限制酶分析鉴定重组质粒时,有同时分离内部2—μm环状DNA以及染色体DNA的潜在干扰。第二种方案,从酵母转化子中分离出DNA,用于转化大肠杆菌细胞。随后质粒可从细菌中既高产又可高质量的通过多种方法分离出来。但以上二方案均不能完全令人满意。