外周血不同处理方式对流式细胞仪检测结果影响的研究

目的 :研究人外周血经不同处理方式对流式细胞仪检测其结果的影响变化 ,观察标本稳定的时间范围 ,确定送检标本在有时限的条件下测定结果的有效性。方法 :应用免疫荧光标记流式细胞仪分析法检测 ,对新鲜外周血制备固定后放置各时段及不同放置时段再制备所测定的淋巴细胞各免疫指标百分率进行比较。结果 :当即测定与制备后放置 4 h、6 h、12 h、2 4 h测定的总 T细胞 (CD3+ /CD1 9- )、总 B细胞 (CD3- /CD1 9+ )、T淋巴细胞亚群 (CD3+ /CD4 + 、CD3+ CD8+ )及比值、活化 T淋巴细胞 (CD3+ CD2 5+、CD3+ HL A- DR± )及 NK细胞的结果均无明显差异 ;4 8h CD3+HL A- DR+结果升高 (P<0 .0 5 ) ,96 h总 T细胞、抑制 /细胞毒 T淋巴细胞 (CD3+ CD8+ )结果均有下降 (P<0 .0 5 )。对当即处理与标本低温放置 6 h、2 4 h再处理测定的结果比较 :6 h内各免疫指标的百分率均无明显差异 ,2 4 h NK细胞、总 B细胞明显下降 (P<0 .0 5 ) ,其他指标尚无明显变化。结论 :流式细胞仪对人外周血淋巴细胞的检测在标本当即制备后的 2 4 h内各指标稳定 ,标本处理后可过夜存放 ;除 CD3+ HL A- DR+外 ,总 B、总 T细胞及其亚群、NK细胞结果可稳定至 72 h;未当即处理的标本可存放 6