凤眼莲重金属螯合肽的分离纯化及快速鉴定

本文以凤眼莲为模式植物,研究植物重金属螯合肽的分离纯化及其快速鉴定。凤眼莲放养在含2μg/ml Cd^(2+)的水中诱导13天。组织抽提液在低盐浓度下(0.01mol/L PBS)经Sephadex G-50柱层析,得到一个含Cd的巯基峰,凝胶过滤HPLC表观分子量为10000。将此巯基峰用过甲酸氧化,凝胶过滤HPLC表观分子量降至1300以下,经反相HPLC分析只有一个肽峰。G-50 Cd-巯基峰与反相HPLC肽峰的氨基酸组成相同,均为(Glu/Gln):Cys:Gly=2:2:1。依据重金属螯合肽的通式(γ-Glu-Cys)_n-Gly,可知n=2。过甲酸氧化后,反相HPLC和氨基酸组成偶联分析是鉴定是否为重金属结合肽以及其n值的快速有效的方法。