胰岛素检测中偶联物制备及免疫学研究

应用碳化二亚胺（ECDI）法和戊二醛（GA）法，将胰岛素与牛血清白蛋白（BSA）偶联，制备成偶联物。从SephadexG－100柱分离纯化结果证实，ECDI法的偶联率略高于GA法，BSA可以作为小分子物质的载体蛋白而进行应用。采用GA法的偶联物免疫绵羊，制备出了抗胰岛素抗体。这是由于在半抗原与载体之间架起了一个较长链的五碳“桥结构”，利于抗体的产生。对流免疫电泳及免疫琼脂双扩散实验证明，抗体有较高的识别性，与125I-胰岛素具有很好的结合能力。标记物和非标记物可竞争性地与抗体结合。说明偶联中并没有破坏与免疫活性有关的必须基团，如二硫键等。为含有二硫键等必须基团的小分子物质的偶联，如药物-抗体偶联物、半抗原-载体偶联物等，进一步避免破坏药物活性和免疫活性打开了通路。