摘要
目的:建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV) 阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异的快速检测方法. 方法:根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt236N)PCR产物中含有DraI酶切位点(5’TTTAAA3’),而变异株(rt236T)无此限制性酶切位点.同时PCR扩增2份已行HBVRT区基因测序证实未出现rtN236T 变异的慢性乙型肝炎患者血清及自行构建的对照质粒,扩增产物经DraI酶切,30 g/L琼脂糖凝胶电泳后,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析. 结果:所建立的ntPCtk-RFLP方法灵敏度高,可以检测到106copies/L的HBV DNA;特异性强,其RFLP分析结果与DNA测序结果一致. 结论:ntPCR-RFLP方法灵敏、特异、简便、实用,适用于ADV耐药变异的临床监测工作.
出处
《世界华人消化杂志》
CAS
北大核心
2005年第4期543-545,共3页
World Chinese Journal of Digestology
基金
首都医学发展科研基金
No.2002-3046山东省卫生厅计划项目
No.2001CA1CAA11
