分泌抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备与鉴定

用纯化的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)免疫Balb/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,取脾细胞与NS0 骨髓瘤细胞融合,经间接EL ISA筛选,3次有限稀释法克隆,得到1株能稳定分泌抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株:6 PR。经鉴定,该单抗为Ig G1 亚类,杂交瘤细胞的平均染色体数目为99条,杂交瘤细胞培养上清及小鼠腹水单克隆抗体的EL ISA效价分别为1∶2 5 6和1∶2 0 4 80。经Western- blot鉴定为针对N蛋白的单抗。6 PR 株单克隆抗体与伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒均不发生交叉反应,显示出良好的特异性。连续培养2 0代后能稳定分泌抗体。此单克隆抗体的获得为PRRSV的研究及快速诊断方法的建立奠定了基础。