绵羊进行性肺炎病毒的抗原成分分析与PCR检测

利用绵羊胎肺细胞进行绵羊进行性肺炎病毒(OPPV)的增殖,对其病毒的细胞病变(CPE)进行探讨。采用10％蔗糖垫子及20％—55％不连续蔗糖密度梯度离心方法纯化OPPV,并用SDS-PAGE和Western Blotting试验分析OPPV的结构蛋白与抗原成分。此外,还应用聚合酶链反应(PCR)检测病毒细胞培养物和感染绵羊体外周血单核细胞中的OPP前病毒cDNA。结果表明,OPPV在绵羊胎肺细胞上所致CPE较典型;纯化的病毒经电子显微镜观察,病毒粒子结构完整,且量大较纯;OPPV有18条多肽带,分子量在18kd—120kd之间,其中含有gp120,gp50及gp473种不同分子量的糖蛋白;OPPV接种绵羊体后p28抗体的出现时间及高峰期均早于p94抗体,且p28抗体的反应强度亦高于p94抗体。经PCR检测表明,OPP前病毒cDNA整合于绵羊胎肺细胞和绵羊体外周血单核细胞的最初时间分别为接毒后24h与第9天。