中华按蚊(Anopheles sinensis)细胞系的建立和特征

从中华按蚊初孵幼虫中,建立一株细胞系,命名 AS-684。建系使用我们改良的199培养基及含有10%F 12的 M-M 培养基。原代培养20天形成单层细胞。传代培养,以1:2分种率,相隔4—5天传代1次,连传70代次。细胞系由4种细胞类型组成,以多边形和纺锤形上皮细胞为优势,掺杂少数双核细胞及长梭形细胞。细胞生长,从24小时开始倍增分裂达高峰,对数期二倍增长时间约为16小时。自45代起,培养基中血清含量从20%降至10—15%。4次电镜观察,没有发现支原体和病毒质点。细胞系以二倍体细胞为主,染色体6条(2n=6)。细胞酯酶同工酶分析,酶谱为两条酶带,PI 值为4.75,4.85。各种代次细胞保存于-196℃的液态氮中及4℃普通冰箱中,经多次试验能成功复苏。