嵌套式PCR法分型检测登革病毒基因

DETECTION AND TYPING OF THE GENOME OFDENGUE VIRUSES BY NESTED POLYMERASECHNIN REACTION

应用一对通用引物同时扩增４个型登革病毒（ＤＥＮ）的ＮＳ１基因部分片段，然后采用嵌套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对ＤＥＮ进行分型鉴定。通用引物扩增基因序列长度为４１３ｂｐ；ＤＥＮ各型内引物扩增序列长度分别是：ＤＥＮ１型为２６２ｂｐ；ＤＥＮ２型为１８９ｂｐ；ＤＥＮ３型为３９２ｂｐ；ＤＥＮ４型为９７ｂｐ。应用嵌套式ＰＣＲ法直接分型检测登革热患者血清标本２１份，发现ＤＥＮ１型阳性１８份，ＤＥＮ２型阳性２份。该法能在２ｄ内完成对ＤＥＮ的分型鉴定，为登革热的早期快速诊断提供了可靠的方法。