摘要
设计二套特异引物,用双温度点套式PCR方法,以煮沸法快速萃取样本DNA为模板,选择性扩增SSUrDNA特定片段用于人体间日疟原虫(P.v.)的检测和鉴定.实验表明,该系统检测P.v.的灵敏度至少可达1.08×10^(-6)(约10个原虫/μL全血);检测经镜检证实的30份采自我国五省疟区间日疟患者冻存血样、10份原虫率约为10^(-4)或厚血片可见原虫而薄血片未见原虫的低原虫率血样及10份、1984年采集在4℃干燥保存至今的间日疟患者滤纸血样,除一份滤纸血样扩增阴性外,其余均在同一大小位置(约516bp)产生特定的扩增片段;而20份非疟区采集的健康供血员血样、4株培养红内期恶性疟原虫(P.f)、1株人源弓形虫(T.g)、1株人源Leishman原虫(L.d)及空白对照均无此扩增带出现.此外,鉴定30份采自云南疟区、镜检确认为恶性疟患者血样及3份采自海南的非典型形态疟原虫感染血样,其中17份产生明显的P.v特定扩增带型,占样本数的51.5％.利用该系统检测及鉴定P.v,从样本处理到结果观察共约需4h.上述结果表明,该系统具备灵敏、准确,操作较为简便、快速,结果易于判定等优点,同时还具有鉴别虫种、确认有无混合感染的潜力.
出处
《中国科学（B辑）》
CSCD
北大核心
1995年第3期265-270,共6页
Science in China(Series B)
基金
国家自然科学基金
