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水稻蛋白质激酶CK2催化亚基的表达和活性测定

Expression and Activity Detection of the Catalytic Alpha Subunit of CK2 from Oryza sativa
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摘要 用RT-PCR的方法分离到了水稻蛋白质激酶CK2催化亚基(OsCK2α)的cDNA,通过大肠杆菌高效表达系统表达了OsCK2α,并利用亲合层析的方法纯化了重组蛋白质GST-OsCK2α.得到的大肠杆菌重组蛋白质GST-OsCK2α能够体外磷酸化CK2的常用底物酪蛋白,并且该磷酸化反应能够被CK2的特异性抑制剂肝素所抑制,研究表明重组CK2α具有典型的蛋白质激酶CK2的活性,为研究水稻CK2及其底物的功能奠定了基础. The cDNA of CK2 （casein kinase 2） alpha subunit from rice tissue was isolated. Recombinant OsCK2α fused with GST（Glutathione S-transferase） was expressed in E. coli and purified by affinity chromatograph. The recombinant OsCK2α can phosphate casein using ATP or GTP as phosphate donor,and this activity can be inhibited by heparin. These data suggested that the recombinant OsCK2α has the typical activity of CK2.
作者 俞芳 朱炎 忻骅 曹凯鸣 董爱武
机构地区 复旦大学生命科学学院生物化学系
出处 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期544-548,共5页 Journal of Fudan University：Natural Science
基金 国家自然科学基金资助项目(30370298)
关键词 水稻 蛋白质激酶CK2 表达 纯化 活性测定 rice protein kinase CK2 expression purification kinase activity
分类号 Q943.2 [生物学—植物学]
  • 相关文献

参考文献16

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共引文献8

复旦学报（自然科学版）
2005年 第4期

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