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应用PCR重组技术构建大肠杆菌分泌型表达载体 被引量:1

Construction of a Expression and Secretion Vector in Escherichia coli by the Recombinant PCR
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摘要 应用PCR重组技术,对大肠杆菌分泌型表达载体pIN-ⅢompA进行改建,除去原载体的HindⅢ位点,将信号肽序列末端两个密码子CAGGCC改为CAAGCT,从而引入一个新的HindⅢ位点,并在其下游接上一段多克隆位点序列。改建后的载体可用于直接插入外源DNA编码序列,表达产物在分泌过程中被切除信号肽而成为天然有活性的蛋白质,操作十分简便。 A modified pIN-Ⅲ-ompA expression vector has been constructed by the recombinant PCR. The modification included:1)removing the Hind Ⅲ site of the original vector,2)mutating the last two codons of the ompA signal peptide sequence from CAG GCC to CAA GCT which codes for the same amino acids,and 3)inserting just downstream from the signal peptide sequence a polylinker removed XbaⅠsite. Any foreign proteins can be readily expressed and secreted using this modified vector by inserting its coding DNA between the Hind Ⅲ site and any restriction site in the polylinker.
出处 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第6期642-645,共4页
关键词 大肠杆菌 分泌型表达载体 聚合酶链反应 Recombinant PCR, Signal peptide sequence, Polylinker, Expression and secretion vector, Plasmid constructing
  • 相关文献

参考文献1

二级参考文献5

同被引文献4

  • 1毕群 黄仪秀 等.-[J].北京大学学报:自然科学版,1997,33(6):737-742.
  • 2毕群,北京大学学报,1997年,33卷,6期,737页
  • 3Wang C,J Biol Chem,1995年,270卷,12250页
  • 4Corey D R,Gene,1993年,128卷,129页

引证文献1

二级引证文献6

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