用^（32）P标记cDNA探针进行核酸斑点杂交检测马铃薯卷叶病毒（PLRV）

利用克隆的马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）外壳蛋白（ＣＰ）基因测ｃＤＮＡ，用切口平移法制成￣（３２）Ｐ标记探针，通过核酸斑点杂交，对马铃薯卷叶病毒ＲＮＡ，提纯的马铃薯卷叶病毒和感染ＰＬＲＶ的马铃薯茎、叶、块茎及带毒桃蚜进行了检测。结果表明：ＰＬＲＶ－ＣＰ基因的ｃＤＮＡ探针特异性强，灵敏度高。可测出提纯的ＰＬＲＶ－ＲＮＡ的最低量为４０ｐｇ，感病马铃薯植株茎叶提取液的最高稀度为１：７５。探针只与ＰＬＲＶ及其ＲＮＡ反应，而不与ＰＶＹ、ＰＶＳ等病毒及其ＲＮＡ反应。从而为马铃薯卷叶病毒的有效诊断，建立了一项比血清学更为可靠、灵敏、特异性强，同时又适于大量样品检测的分子生物学方法。