摘要
猪流行性腹泻病毒PED-G1病毒株是从广东省表现有流行性腹泻病的某猪场的病猪病料中分离获得。在每毫升维持液中加60微克胰酶,将PEDV分离物接种于Vero传代细胞上培养24—48小时,Vero细胞呈现细胞融合、形成合胞体等特征的细胞病变。经动物回归、电子显微镜观察、血清学方法、理化性质测定以及病毒核酸鉴定等方法检验,确定分离物为冠状病毒科中的猪流行性腹泻病毒。 经驯化,该病毒株可以在维持液中不加胰酶成份条件下先后适应于Vero、PK_(15)、ST等传代细胞上培养、增殖,这在国内外文献中尚未见到。该病毒株在PK_(15)和ST细胞上产生的细胞病变比在Vero细胞上呈现更为明显,更容易观察。它在PK_(15)细胞上病毒毒价可达10^(-7)TCID_(50)/0.05ml。 建立了用该毒株以PK_(15)传代细胞进行微量血清中和试验方法,它不与TGE等阳性血清中和。检测出发病过程和免疫过的猪血清呈阳性反应。表现特异性好、敏感、准确,可做为PED特异性诊断方法,比用胎猪小肠原代细胞或用Vero细胞加胰酶处理的方法具有来源和应用方便、准确和经济等优点。 用Vero、PK_(15)等传代细胞繁殖该病毒作为抗原制备油佐剂灭活疫苗,免疫动物安全性好,保护率高,区域防制效力达96％以上,最后达到疫病安全控制,具有经济、有效、安全、方便等优点,可以?
A Porcine Epidemic Diarrhea Virus strain, PEDV - G1, was isolated from an infected piglet in Guangdong province. PEDV -G1 has been successfully adapted to VERO, PK15 and ST cell lines with no trypsin in the medium.The established micro -serum neutralization test with PEDV -G1 could only neutralize antibodies a-gainst PEDV. The test is expected to be used as an specific, accurate, easy and economic method for diagnosis of PED.It is proved that oil adjuvant vaccine prepared with cell culture of PEDV-G1 is safe and effective. The PEDV-G1 strain can be used for production of commercial vaccine.
