蜗牛酶消化白念珠菌细胞壁的研究

应用分子生物学的方法在基因水平上诊断白念珠菌病或作菌种鉴定,具有快速准确、简便特异的优点,但白念珠菌为真核细胞,胞壁坚厚,常规法提取DNA较为困难,目前虽有超声粉碎、冷冻研磨等物理破壁方法,但损伤念珠菌DNA的完整性,国外多采用化学酶类消化念珠菌的细胞壁,使其成为原生质体,然后按常规法提取其DNA。所用的几丁质酶、葡萄糖醛酸酶必须依赖进口,价格昂贵、用量大,难以推广应用。国产蜗牛酶虽能替代进口酶,但其破壁条件的选择,主要是破壁缓冲液的性质能显著影响其破壁效果。为了找到蜗牛酶的最佳破壁效果,本实验选择了三种不同破壁液对其破壁效果进行探索,试图建立一种简便易行、稳定可靠、效果好的破壁方法。