基因工程重组嵌合抗原作为丙型肝炎诊断试剂的应用

APPLICATlON OF HCV EIA DIAGNOSTC KIT OFCHIMERIC ANTIGENS

利用基因工程重组技术获得了三种嵌合抗原，两种为丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）结构区核壳蛋白Ｃ２２和ＮＳ３非结构区Ｃ３３ｃ双表位的嵌合抗原Ｂ１和Ｂ２，另一种是既具有上述两段优势抗原，还包括ＮＳ４非结构区Ｃ１００多表位的嵌合抗原Ｃ２５。在大肠杆菌水解酶阴性的Ｂ株菌中表达的产物，经ＳＤＳ一ＰＡＧＥ分析，Ｂ１、Ｂ２和Ｃ２５嵌合抗原分子量分别为４３、５３和７０ｋＤ，抗原蛋白表达量分别各占电泳蛋白条带的４０％、１０％和３５％左右。３个嵌合抗原的免疫活性分析证明，它们都具有相应区段的免疫活性。用嵌合抗原分别组装成ＥＩＡ试剂盒，经国家ＨＣＶ诊断试剂质控参比血清验证，Ｂ１嵌合抗原的抗体检出率为９５％Ｂ２嵌合抗原为９１％，Ｃ２５为９４％，均高于Ｃ３３ｃ和ＭＡＰＣＰ１９混合抗原（８８％）。Ｂ１嵌合抗原与核壳蛋白Ｃ区和非结构ＮＳ４区（Ｃ一ＮＳ４）双表位化学嵌合多肽抗原联合应用，抗体检出率高达９７％，完全符合国家ＨＣＶ诊断试剂质控要求。