重组人源抗HBsAg Fab的糖基化分析

目的:分析重组人源抗HBsAgFab的糖基化。方法:应用PAS糖染色法和经酶切糖苷酶H去糖基后,用MALDI-TOF-MS质谱仪对重组人源抗HBsAgFab的糖基化进行分析。结果:PAS染色法的结果显示,毕赤酵母(Pichiapastoris)表达的重组人源抗HBsAgFab呈淡红色。用质谱仪测定P.pastoris表达的经内切糖苷酶H去糖基后的重组人源抗HBsAgFab的相对分子质量(Mr),从50678.49降低到49245,相差1433.49(约相当于少了8个甘露糖基)。结论:P.pastoris表达的重组人源抗HBsAgFab,为一种具有生物活性的低糖基化的蛋白,为深入研究其性质及功能奠定了基础。