摘要
为了研究鸡马立克氏病病毒(MDV)pp38基因和1．8 kb mRNA转录子基因间一双向启动子的活性,本研究以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,构建了启动子以pp38方向转录的重组质粒pP(pp38)-EGFP和以1．8 kb方向转录的重组质粒pP(1．8-kb)-EGFP．将这二个重组质粒分别转染鸡胚成纤维细胞(CEF)、MDV rMd5克隆株感染的CEF(rMd5-CEF)以及pp38基因缺失的MDV rMd5Δpp38克隆株感染的CEF(rMd5Δpp38-CEF),结果只有在转染rMD5-CEF样品中才能检测到EGFP的表达；将上述二个EGFP重组质粒分别与能表达pp38的重组质粒pcDNA-pp38共转染CEF和rMd5Δpp38-CEF,在CEF中仍检测不到EGFP的表达,而在rMd5Δpp38-CEF形成的空斑周围,能检测到EGFP的表达．结果提示pp38是该双向启动子发挥作用的必要条件,但该启动子活性的发挥仍需除pp38以外的其他因子的共同作用．将pcDNA-pp38质粒和pp24表达质粒pcDNA-pp24,以及EGFP表达质粒共转染无MDV感染的CEF时,能检测到EGFP的表达．核酸阻滞试验表明,pp38必须和pp24共表达时,才能和启动子结合,表现出阻滞现象．说明pp38和pp24可能以聚合体形式与启动子结合并增强启动子的转录活性．还证明了该双向启动子在1．8 kb mRNA转录子方向的启动活性显著高于pp38基因方向．
出处
《中国科学（C辑）》
CSCD
北大核心
2005年第6期519-526,共8页
Science in China(Series C)
基金
国家自然科学基金重点项目(批准号:30300450)
国家自然科学基金(批准号:30070544)资助
