胎儿幼稚红细胞产前遗传学诊断的研究

FetalErythroblastsfromMaternalBloodforPrenatalGeneticDiagnosis

目的：探讨利用早期孕妇血中胎儿幼稚红细胞，进行无创伤性胎儿染色体异常产前诊断的可行性。方法：对１３例孕早期（８～１４周）已知孕男性胎儿孕妇外周血中糖蛋白Ａ（ＧＰＡ）表达阳性的细胞，进行荧光激活细胞分离（ＦＡＣＳ）及Ｙ染色体特异的引物介导原位标记（ＰＲＩＮＳ）检测，同时在测定４１例正常孕妇孕早期（８～１４周）血清妊娠相关血浆蛋白Ａ（ＰＡＰＰ┐Ａ）作为正常参考值的基础上，对５例可疑孕Ｄｏｗｎ′ｓ综合征胚胎的高龄孕妇进行ＰＡＰＰ┐Ａ检测、ＧＰＡ阳性细胞的ＦＡＣＳ及２１号染色体ＰＲＩＮＳ检测。结果：１３例孕男性胎儿的孕妇血ＧＰＡ阳性细胞中，胎儿幼稚红细胞的平均含量达到１４．５％；５例高龄孕妇血清ＰＡＰＰ┐Ａ均在正常范围内，ＧＰＡ阳性细胞中胎儿幼稚红细胞的２１号染色体ＰＲＩＮＳ检测未见异常。结论：早期孕妇血中存在胎儿幼稚红细胞，并可利用这些细胞对胎儿染色体非整倍性异常进行产前分子┐细胞遗传学诊断。

Objective:Tostudyfetalerythroblasts(FE)frommaternalperipheralbloodforthediagnosisoffetalaneuploidies.Methods:FEexpressingtheglycophorinA(GPA)wereisolatedfrom13pregnantwomenwithmalefetus(8～14w)byfluorescence-activatedcelsorting(FACS).FEwereidentifiedbyoligonucleotideprimedinsitulabeling(PRINS)withYcentromericsateliteDNAprimer.Theconcentrationofpregnancy-asociatedplasmaproteinA(PAPP-A)wasmeasuredbyen-zyme-labeledimmunosorbentassay(ELISA)inserumsamplesof41normalpregnantwomen(8～14w).In5pregnantwomensuspiciousoffetalDown′ssyndrome(10～13w)theserumandFEwereexaminedbyPAPP-A,GPA/FACSandPRINSwith21chromosomecentromericprimer.Results:DetectionofflowsortedFEfrom13pregnantwomenbyYprimershowed14.5%ofGPApositivesignal.TherewasnodiferenceinserumlevelofPAPP-Abetween5pregnantwomenand41normalcontrols,andalGPApositivecelnucleiofthe5casesdisplayedtwosignalswith21chromosome.Conclusion:Measurementoffetalerythroblastsfrommaternalbloodforthediagnosisofgeneticfetalaneuploidiesisapromisingnon-invasive,rapidandreliabletechnique.