摘要
为构建人血管内皮细胞生长因子(VEGF)165腺病毒表达载体,体外转染大鼠骨髓问充质干细胞,并研究其相关特性,采用细菌内同源重组技术快速构建Ad—VEGF165腺病毒重组质粒,经酶切及测序鉴定正确后转染人胚肾细胞HEK293包装成为重组Ad—VEGF165腺病毒,并进行电镜观察及滴度测定。感染大鼠骨髓间充质干细胞观察VEGF165基因的转录和表达。研究发现,酶切鉴定及基因测序证实重组腺病毒质粒含有hVEGF165 cDNA,电镜显示包装细胞中有大量病毒颗粒存在,测定包装的病毒滴度为6.3×10^10 TCID 50/ml。逆转录一聚合酶链反应(RT~PCR)、免疫组织化学及免疫印迹检测骨髓间充质干细胞内有VEGF。的转录和表达。提示:构建的VEGF腺病毒表达载体可有效感染骨髓间充质干细胞,并在体外高效表达。
出处
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期216-216,共1页
Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong