用血清学方法测定苏云金芽孢杆菌晶体蛋白含量

SEROLOGICAL ASSAYS FOR QUANTITATION OF THE SOLUBLE CRYSTAL PROTEIN OF BACILLUS THURINGIENSIS

用苏云金芽孢杆菌ＨＤ－１、７２１６和ＣＴ－４３菌株晶体蛋白的碱溶和胰蛋白酶酶解产物作抗原，制备相应的抗血清。用环状沉淀反应、双相单扩散反应和火箭免疫电泳等技术测定了苏云金杆菌几个菌株和制剂的晶体蛋白的含量。用环状沉淀反应测定晶体蛋白的最低量为０．２２μｇ／ｍＬ，火箭免疫电泳为１５μｇ／ｍＬ，双相单扩散反应为６２μｇ／ｍＬ。生物测定的结果与几种血清学方法测定的结果有一定的相关性，菌株ＨＤ－１、７２１６和ＣＴ－４３的伴胞晶体经碱溶和胰蛋白酶处理后对小菜蛾幼虫的ＬＣ５０值分别为０．１４８、０．２４７和０．０９７μｇ／ｍＬ；经碱溶而未经胰蛋白酶处理的晶体蛋白对小菜蛾幼虫的ＬＣ５０值分别为１．８６７、３．１４７和１．０２２μｇ／ｍＬ，两种处理方法对晶体蛋白毒力影响很大。环状沉淀反应测定苏云金芽孢杆菌晶体蛋白含量灵敏度比火箭免疫电泳高，操作简便而快速；双相单扩散法灵敏度与火箭免疫电泳接近。