鸡贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备

鸡贫血病毒是鸡传染性贫血病的病原体,它广泛存在于世界各地,成为危害养禽业的主要病原之一。鸡贫血病毒基因组含有3个开放阅读框架,分别编码分子量为51.6kDa(VPl)、24kDa(VP2)和13.6kDa(VP3)的3种蛋白质。本文将克隆化VP2基因亚克隆到PET-32a(+)载体上并进行原核表达,用PET-32a(+)表达的VP2融合蛋白免疫Balb/c小鼠,经过杂交瘤细胞的建立、融合细胞的筛选和克隆化培养,获得一株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3C5。腹水单克隆抗体的ELISA效价为1:409600,经Western-blotting证明单抗3C5为针对VP2融合蛋白的单抗。为VP2融合蛋白的纯化和鸡贫血病毒的检测、鉴定和奠定了基础。