抗金霉素单克隆抗体的制备与鉴定

Preparation and identification of monoclonal antibodies against chlortetracycline

目的制备抗金霉素(CTC)的单克隆抗体(mAb)。方法采用甲醛作为连接基,将CTC与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,以ELISA法对杂交瘤细胞的稳定性和mAb的特性进行鉴定。结果获得1株可稳定分泌mAb的杂交瘤细胞1H4-C4-C10,间接ELISA方法测定,细胞上清抗体效价为1∶1000,腹水效价为1∶5×105,为IgG1,与四环素交叉反应率为44.4%,与土霉素的交叉反应为8.2%。体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定。结论成功制备了针对CTC的mAb,为进一步研制检测CTC的ELISA试剂盒奠定了基础。