摘要
目的寻找一种简便、稳定、敏感性高、特异性强，且易于推广的ＲＮＡ分离纯化方法，用于丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测。方法应用双功能交联剂在乳胶颗粒上交联１段与ＨＣＶ核酸５′端非结构区（５′ＮＣ）序列互补的探针，制备对ＨＣＶ特异的活化乳胶颗粒。将这种活化微粒混悬在６ｍｏｌ／Ｌ硫氰酸胍中，当待测血清与之混合后，病毒ＲＮＡ释放并与微粒上的探针杂交，极易被分离出来。检测临床５０例血清样本，并与经典法、蛋白酶Ｋ法、血清直接扩增法进行比较。结果固相法检出率为４４％，蛋白酶Ｋ法、经典法和直接血清扩增法检出率分别为３６％，３８％和３０％。结论固相法分离核酸用于ＨＣＶ的ＲＴ－ＰＣＲ检测，简便、敏感性高、重复性好，是一种较理想的ＲＮＡ分离技术。
ObjectiveToinvestigatesolidphasehybrid,asimple,rapidandaccurateRNApu-rificationmethodforpolymerasechainreaction(PCR)detectionofhepatitisCvirus(HCV).Meth┐ods100bpHCVspecialprobeswereconjugatedtolatex.Theactivatedlatexwassuspendedin6mol/Lguanidinethiocyanate.Whenmixedwiththeinfectedserum,RNAwasreleasedandhybridedwiththeprobesonlatex,easilybeingpurified.ResultsIn50patientsdetectedusingthismethod,solidphasemethodwasprovedtobeverysimpleandhavehighsensitivityandgoodspecificity.Con┐clusionsSolidphasemethodshouldbeusefulforthedetectionofHCVbyusingPCRclinicaly.
