摘要
通过物理吸附和共价作用机制,制备两种链亲和素-磁性微粒,即链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒,并对其在不同缓冲液中的稳定性进行研究;采用酶抑制法测定两种链亲和素-磁性微粒对游离生物素的结合能力;分别以紫外吸收和固相核酸杂交方法,测定两种链亲和素-磁性微粒对生物素标记寡核苷酸探针的固定化容量及活性,并与Dynabeads（R）M-270 Streptavidin进行比较.结果表明：通过物理吸附作用制备的链亲和素-金磁微粒,适用于核酸杂交与检测常用的STE（Tris-NaCl-EDTA）缓冲系统,通过共价作用形成的链亲和素-氨基磁粒,适用于STE和磷酸盐（PBS）缓冲系统;1 mg链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒对游离生物素的最大结合容量分别为4950和5115 pmol;对生物素标记寡核苷酸探针（24 mer）的结合容量分别为2839和2978 pmol,测定结果均是Dynabeads（R）M-270 Streptavidin的6～7倍;与FITC-标记互补寡核苷酸的杂交结果表明,固定于链亲和素-磁性微粒表面的寡核苷酸探针保持了较好的生物学活性.
出处
《中国科学（B辑）》
CSCD
北大核心
2006年第4期353-360,共8页
Science in China(Series B)
基金
国家自然科学基金(批准号:20273050)
国家高科技发展计划(批准号:2005AA205220)资助项目
