摘要
目的了解结核分支杆菌链霉素（Ｓｍ）耐药基因突变情况，建立快速检测耐药突变株的方法。方法通过聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析了２２株结核分支杆菌临床分离株的ｒｐｓＬ基因，并应用ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）进一步分析其突变的部位和性质。结果以Ｈ３７Ｒｖ标准株为对照，５株敏感株的ｒｐｓＬ基因未见ＳＳＣＰ泳动异常、有ＭｂｏⅡ酶切位点；１３株耐Ｓｍ株中，１１株（８６％）有ｒｐｓＬ基因泳动异常、无ＭｂｏⅡ酶切位点；４株耐其它抗结核药物株中，也有１株ＳＳＣＰ泳动异常、并无ＭｂｏⅡ酶切位点。结论大多数结核分支杆菌Ｓｍ耐药分离株有ｒｐｓＬ突变，而突变位点大多位于第４３位密码子。应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＰＣＲ－ＲＦＬＰ可能成为快速检测结核分支杆菌耐药突变株的新方法。
ObjectiveToobservethemutationsofrpsLgeneinM.tuberculosisstreptomycin-resis-tantisolates,andtodevelopanewmethodfordetectingdrugresistance.MethodDetectingtherpsLasacontrol.In22M.tuberculosisclinicalisolates,therpsLPCR-RFLP.ResultsStrainH37Rvwasusedasacontrol.In22M.tuberculosisclinicalisolates,therpsLPCRfragmentsfrom5drug-suscep-tibleisolateshadnodiferencesintheSSCPprofileswithstrainH37Rv,andwererestrictedbyMboⅡ.11ofthe13streptomycin-resistantisolatesshowedapparentdiferencesintheSSCPprofilesandwerenotdigestedwithMboⅡ.1ofthe4otherdrug-resistantisolatesalsohadapparentSSCPdiferencesandwasnotdigestedbyMboⅡ.ConclusionsTheresultssuggestedthattherpsLgenemutationwasfrequantlyobservedinM.tuberculosisstreptomycin-resistantisolates,andusualysituatedatcodon43,PCR-SS-CPandPCR-RFLPmightbecomeasimple,rapidandreliablediagnostictestfordrugre-sistance.
出处
《中华结核和呼吸杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1996年第6期342-345,共4页
Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases
关键词
结核分支杆菌
聚合酶链反应
药物耐受性
MycobacteriumtuberculosisPolymeraseChainReactionPolymorphism,single-strandedconformationalPolymorphism,restrictionfragmentlengthDrugtolerance
