摘要
建立光敏生物素补骨脂素(BP)标记引物逆转录原位聚合酶链反应技术(标记法),并以此研究石蜡包埋肝组织中丙型肝炎病毒(HCV)的定位分布。方法用葡聚糖凝胶纯化HCV靶基因被标记引物,在其负链5′非编码区将BP标记置链4处,所得终产物145bp。分别用标记法、间接逆转录原位聚合酶链反应(间接法)和原位杂交检测HCV。结果表明用BP标记引物进行聚合酶链反应是可行的,并具有良好的特异性。应用间接法及标记法检测HCV,其检出率分别为59%(10/17)和53%(9/17),差异无显著意义(χ2=0.12,P>0.05);原位杂交对HCV的检出率仅为24%(4/17),明显低于上述两种方法,差异有显著意义(χ2=3.97和4.37,P<0.05)。HCV的分布以肝细胞浆型为主,单核细胞及胆小管上皮细胞也可见阳性信号。结论间接法和标记法对检测石蜡包埋肝组织中的HCV均具有良好的敏感性和特异性;在肝组织中,HCV不仅存在于肝细胞,而且也存在于单核细胞及胆小管上皮细胞中,提示肝细胞可能不是HCV唯一的复制部位。
出处
《中华医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1996年第6期431-434,共4页
National Medical Journal of China
基金
国家自然科学基金