放射性核素标记的单克隆抗体(McAb)定量测定的一种方法

本文用标记McAb与靶细胞结合实验的放射性分析法,为标记单抗的定量提供一个方法,现介绍如下。 标记McAb定量的实验设计 在标记McAb与靶细胞结合反应实验中,每个实验管内液体体积相同,所用的靶细胞恒定在过量的适当浓度(C),标记McAb浓度(T)变化时,根据质量作用定律,McAb与抗原反应处于平衡时得公式Ka=B/(C—B)F(1),Ka为亲和常数,B为与抗原结合的标记抗体,F为游离的标记抗体浓度。整理(1)得KaCF—KaBF=B(2)。(2)两边除以KaCB整理后得F/B=1/KaC+F/C(3)。以F=T—B代入式(3)整理得T/B=1+1/KaC+T/C-B/C(4)。因T<C,所以B<C,则(4)中B/C相对很小可忽略,式(4)可简化为T/B=1+1/KaC+T/C(5)。可见T/B与T呈近似的直线关系,实验中若每管中加入的标记McAb浓度也恒定,同时再加入不同浓度的未标记的McAb,则T/B与未标记McAb仍呈近似的直线关系。此直线与T/B=1的直线相交。