摘要
为探讨重组鼠骨形态发生蛋白-7(rrBMP-7)真核表达载体在心肌细胞获得稳定高效表达的可行性,采用PCR技术扩增BMP-7基因,将其插入真核表达载体pCDNA3·1(+)中;利用差速法分离培养心肌细胞,将构建的BMP-7表达质粒转染心肌细胞,检测其表达效率。结果表明,经过PCR及酶切鉴定证明获得了真核表达质粒pCDNA3·1-rrBMP7;通过逆转录PCR和免疫细胞化学鉴定证明BMP-7在转染后的心肌细胞中得到了稳定高效表达。结论:应用本文介绍的方法,成功构建了BMP-7真核表达质粒并在心肌细胞中稳定高效的表达,为应用于抗缺血再灌注损伤的研究创造了条件。