甲型肝炎病毒的RT-PCR-ELISA检测法

目的建立一种半定量检测甲型肝炎病毒(HAV)RNA的RT-PCR-ELISA方法。方法将5′端磷酸化的特异性探针包被在氨基化的微孔板上,以生物素标记的探针为引物,提取样品中的HAVRNA,反转录并扩增HAVDNA,变性后的PCR产物与探针杂交,并被捕获在微孔板上,再与酶标亲和素结合,显色测定。结果所建立的方法结果判断客观,灵敏度比凝胶电泳法高一个数量级,分析不同时间检测结果,差异无显著意义。结论已建立了半定量检测HAVRNA的RT-PCR-ELISA方法。