不同方法分离骨髓血MNC的质量对比

目的探讨从骨髓血分离单个核细胞(MNC)的最佳方法,以满足临床自体干细胞移植的质量要求。方法将骨髓血离心分出部分血浆后剩余的红细胞悬液缓缓加入盛有淋巴细胞分离液的无菌塑料袋内,以1200 r/m in,20m in,4℃离心,分出单核细胞层至500m l的空袋内,然后加入0.9%NaC l液,2500 r/m in,4℃离心7m in,重复洗涤2次,此制备方法作为A组;B组:改变分离MNC分离过程的离心条件为1800 r/m in,4℃,20m in离心,洗涤过程同A组;C组分离MNC离心条件同A组,洗涤时500m l改为200m l无菌空袋,洗涤3次,比较A,B,C三组制备过程对MNC回收率、红细胞残余量的影响。结果A组MNC回收率明显高于B组,红细胞残余量二者无明显差异;A组与C组相比,C组MNC回收率高于A组,红细胞残余量无明显差异。回顾性调查分析18例用于糖尿病足患者,总有效率80%以上。结论分离MNC离心条件和洗涤过程的不同对MNC回收率有重要影响。应用以上方法制备的MNC用于临床治疗是可行的,且不受样本体积限制。