内切酶SCaI对不同纯度质粒的酶解效率探讨

限制性内切酶SCaI适用于多种质粒载体,尤其是融合蛋白表达载体,pGEX系统,因它具有二个SCaI酶切位点,因此用SCaI酶解图谱鉴定以pGEX系统为载体的重组子甚为便捷。简便碱裂解法提取重组DNA省时,省耗。本文探讨了SCaI对用常规和简便两种碱裂解法提取的重组DNA的酶解效率。结果表明:(1)简便碱裂解法抽提的重组DNA,用EcoRI、EcoRV、PstI、BamHI等限制性内切酶酶解,可以获得较好的酶解效率。(2)SCaI对用常规碱裂解法抽提的重组DNA有好的酶解效率。(3)SCaI对质粒DNA的纯度要求较高,对用简便碱裂解法抽提的重组DNA酶解效率很差。