快速检测人血清可溶性CD40配体ELISA试剂盒的研制及评价

目的建立快速灵敏、特异和稳定的检测人血清可溶性CD40配体（sCD40L）酶联免疫测定（ELISA）试剂盒。方法采用自制的鼠抗人CD40L单克隆抗体La为包被抗体，识别人CD40L不同位点的生物素标记的自制单克隆抗体Lb为检测抗体，以HRP-链亲合素-多聚赖氨酸复合物为反应底物，采用反应板包被孔中直接加入检测抗体，试验时仅需再加入HRP-链亲合素-多聚赖氨酸复合物，研制一种快速双抗体夹心的检测人血清sCD40L ELISA试剂盒，并测定400例健康人血清sCD40L含量。结果成功研制出快速检测人血清sCD40L ELISA试剂盒，灵敏度为0．06ng／ml。该试剂盒于4℃放置3个月，CV〈±5．7％，回收率为96．2％～105．9％，提示该检测系统具有良好的灵敏度、稳定性和准确性，与国外商品化同类试剂盒的分析结果相似。应用该试剂盒测得400例健康人血清sCD40L含量为（2．134-2．00）ng／ml。结论研制成功快速、灵敏、特异和稳定的检测人血清sCD40L ELISA试剂盒，能够对血清中sCD40L进行准确定量分析。