冬虫夏草对小鼠黑素瘤细胞肺转移的影响

以小鼠黑素瘤细胞肺转移模型，探讨了冬虫夏草热水提取物（HW）的抑制作用。 材料及方法：①材料：培养的冬虫夏草（ Cordyceps sinensis ）菌丝体粉末以90-95℃热水提取3h，过滤、减压浓缩至约1／3量，再以90-95℃杀菌30min，-38℃冷冻干燥得提取物。②实验动物：6周龄C57BL／6雌性小鼠，在恒温恒湿环境下预饲养1周后用于试验。③实验性肺转移抑制试验：将小鼠分成4组，其中3组连续28d口饲溶解于蒸馏水的HWE（分别为100、250、750mg／kg），对照组口饲蒸馏水。肿瘤细胞使用B16-F10黑素瘤细胞株。实验开始后第15日经小鼠尾静脉注射细胞悬液（1×10^5细胞，只），第29日解剖取肺，固定后计数肺表面转移结节数。④自发性肺转移抑制试验：肺高转移性B16-BL6黑素瘤细胞用PBS配制成1×10^7细胞／ml，每只小鼠足跖部皮下注射50μl（5×10^5细胞）。移植后第15日，将小鼠分成4组，其中3组分别连日口饲上述浓度的HWE，对照组口饲蒸馏水。给药后第8日，确认肿瘤生长直径约为1cm后，乙醚麻醉将小鼠右后肢从根部切断，切断部位消毒、缝合。其后2周内继续分别口饲HWE及蒸馏水。移植后5周试验结束，解剖取肺计数肺表面转移结节数。⑤在NK活性抑制状态下，冬虫夏草对实验性肺转移的影响：受试组预饲HWE250mg／kg2周（对照组口饲蒸馏水），抗体给予组（包括口饲蒸馏水的对照组与HWE组）在试验开始后第13日尾静脉注射抗asialo GM1抗体0．3ml。翌日4组均经尾静脉注射B16-F10黑素瘤细胞悬液（1×10^5细胞/只）。继续给药2周，第29日解剖取肺，固定过夜，计数肺表面转移结节数。⑥在巨噬细胞活性抑制状态下，冬虫夏草对实验性肺转移的影响：HWE组小鼠预饲250mg／kg2周，第13日小鼠尾静脉注射2．氯腺苷10μl（2-氯腺苷50μg/只，分组及检测方法同⑤）。