壬基酚对体外培养大鼠Setoli细胞的毒性作用

目的通过本研究观察壬基酚对体外分离培养的大鼠Setoli细胞的毒作用以及对该细胞雄激素结合蛋白（Androgenbinding protein,ABP）基因转录的影响。方法选用28-30日龄的SD雄性大鼠,颈椎脱臼法处死大鼠,消毒后取睾丸,通过原代分离培养纯化大鼠Setoli细胞,然后通过MTT实验检测壬基酚对Setoli细胞的毒性作用,实验设置剂量分别为10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9和10-10mol/L,根据MTT实验结果,再次设置10-5、10-6、10-7和10-8mol/L以及空白对照和溶剂对照组染毒细胞,通过ABP原位杂交实验观察壬基酚对Setoli细胞ABP基因转录功能的影响。结果MTT实验结果显示当壬基酚浓度为10-4mol/L时,吸光度值明显降低,细胞存活率仅为3.03%,其差异有统计学意义（P〈0.05）,具有明显的细胞毒性,而10-5mol/L以及低于此浓度均未见明显细胞毒性。ABP原位杂交结果显示,ABP在Setoli细胞的胞核和核周表达明显,两对照组的表达强于各染毒剂量组的细胞,图像分析显示,随着染毒剂量的增高,ABP mRNA的表达强度降低,但仅见10-5mol/L和10-6mol/L剂量组ABP mRNA的表达与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论壬基酚对体外培养大鼠Setoli细胞存活率的最大无作用剂量为10-5mol/L。壬基酚能抑制大鼠Setoli细胞ABP的基因转录,这可能是壬基酚导致生殖毒性的机制之一。