人促红细胞生成素基因表达的研究

为进一步探讨运用促红细胞生成素（ＥＰＯ）基因治疗肾性贫血的依据，本研究将人ＥＰＯｃＤＮＡ构建到逆转录病毒载体ＬＸＳＮ中，然后将重组载体转染到包装细胞系ＰＡ３１７中，经选择培养后，运用ＤＮＡ－ＰＣＲ、ＲＴ－ＰＣＲ、原位杂交及ＥＰＯ生物活性检测，观察ＥＰＯｃＤＮＡ和ＬＸＳＮ－ＥＰＯ在ＰＡ３１７中的表达。结果表明：ＬＸＳＮ－ＥＰＯｃＤ－ＮＡ成功整合到ＰＡ３１７基因组中；转染的ＰＡ３１７细胞能表达ＥＰＯｍＲＮＡ和分泌ＥＰＯ（高达４０．５±２．７５ｍｕ／ｍｌ）；转染的ＰＡ３１７细胞中有明显的ＬＸＳＮ－ＥＰＯｍＲＮＡ表达。