肝肿瘤细胞HepG2培养条件的摸索及代谢能力的研究

Study on the cultural condition of Hep G2 cells and its comparison to the metabolic ability of CHL and 3T3 cells

目的以MTT试验方法计算环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)对Hep G2细胞和体外安全性评价常用细胞系CHL、3T3细胞的50%致死浓度LC50,间接比较几种细胞系的代谢能力并确定Hep G2细胞适宜的培养试验条件。方法用需代谢活化的阳性物CP以含血清和不含血清的培养液配制染毒液,按10.0,7.21,5.19,3.73,2.69,1.93,1.39,1.00 mg/ml浓度对CHL、3T3细胞和以不同培养液培养的Hep G2细胞染毒,在24 h时间点以MTT方法对细胞存活情况进行分析,计算LC50,比较各种细胞和不同培养条件下Hep G2细胞对CP的代谢活化水平,并观察不同培养条件下Hep G2细胞的生长状态。结果MTT试验结果表明Hep G2细胞对CP的代谢能力最强,CHL细胞次之,而3T3细胞对CP的代谢能力最弱;三种不同培养液培养的Hep G2细胞无论染毒液是含血清的还是不含血清的均观察到CP对细胞的LC50:MEM>DMEM>RPMI 1640,Hep G2细胞在DMEM、RPMI1640两种培养液中均生长状态良好,尤其是RPMI 1640培养的Hep G2细胞,在无血清的染毒液培养下即能获得较多的细胞又能表现出较强的代谢CP的能力。结论Hep G2细胞对CP的代谢活化能力较CHL和3T3细胞强,以RPMI 1640培养的Hep G2细胞生长状态良好且较DMEM和MEM培养的细胞表现出更强的代谢活化CP的能力,能获得较理想的培养和试验结果。