摘要
目的:研究阿魏酸钠(SF)预处理对心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的延迟保护作用的机制。方法:采用MTT比色法检测细胞存活率,生化检测细胞LDH活性、MDA含量、SOD活性和GPx活性.Western Blotting法检测SOD、GPx、HSP70的表达、TUNEL法与PI-Annexin V法测定细胞凋亡、流式细胞仪测定线粒体膜电位(△ψm)及ROS生成、分光光度法测定mPTP开放情况等指标,用终浓度为3.36mmol·L-1的SF预处理原代培养的大鼠乳鼠心肌细胞3h,24h后观察其对A/R损伤的保护作用及其ERKl/2抑制剂PDl84352(终浓度为0.5μmol·L-1)与基因转录抑制剂Act D(终浓度为5μmol·L-1)影响。结果:SF预处理能显著提高心肌细胞存活率、降低LDH活性、MDA含量减少;SOD、GPx活性增加,但其蛋白表达量却无明显差异;HSP70表达量显著上凋;ROS生成显著减少、mPTP开放与线粒体膜电位(△ψm)稳定、凋亡细胞比率减少。PDl84352、Act D均能取消SF预处理的上述作用。结论:SF预处理对心肌细胞A/R损伤延迟保护作用的机制可能与ERKl/2激活、上调HSP70蛋白表达、维护SOD、GPx等蛋白正常结构与功能,使得ROS生成减少、mPTP关闭、线粒体膜电位(△ψm)稳定、凋亡细胞减少有关。